Fixable Viability Stain（胺反应死活染料）染色流程

发布时间：2025-09-30

FVS干粉需贮存于-80℃中。首次使用FVS（Fixable Viability Stain）染料需要使用DMSO（室温）溶解配备工作液，不同的染料加入DMSO的用量具体参考说明书，工作液可分装储存于-20℃，3个月内使用有效。

Description	Excitation（nm）	Emission（nm）	Laser	Fluorescence Channel	加入DMSO体积（uL）
BD Horizon Fixable Viability Stain 440UV	338	436	UV	DAPI	363
BD Horizon Fixable Viability Stain 450	406	450	Violet	V450，Pacific Blue，BV421	400
BD Horizon Fixable Viability Stain 510	408	512	Violet	V500，BV510	260
BD Horizon Fixable Viability Stain 575V	396	572	Violet	BV605，Pacific Orange	340
BD Horizon Fixable Viability Stain 520	498	521	Blue	FITC，Alexa Fluor488	130
BD Horizon Fixable Viability Stain 570	547	573	Yellow-Green/Blue	PE	220
BD Horizon Fixable Viability Stain 620	523	617	Yellow-Green/Blue	PE-CF594	230
BD Horizon Fixable Viability Stain 660	649	660	Red	APC，Alexa Fluor647	190
BD Horizon Fixable Viability Stain 700	657	700	Red	APC-R700，Alexa Fluor700	310
BD Horizon Fixable Viability Stain 780	759	780	Red	AP-Cy7	180
*Do not use reagent conjugated with these fluorochromes in the same tube.

 

1.获取单细胞悬液

2.使用不含叠氮钠和蛋白的1×DPBS清洗细胞一次，调整细胞浓度至10^6个/mL。

3.向1mL细胞悬液中加入1 μL FVS工作液(1:1000)并立即涡旋混匀(工作浓度最好滴定确定)。

4.室温下孵育10-15 min,或37 ℃孵育5-7min,或2-8 ℃孵育30-60min。

5.加入2 mL BD Stain Buffer(FBS/BSA),离心清洗两次(300 g×5 min)。(该Stain Buffer含蛋白成分，可以中和游离的FVS)

6.弃上清，重悬细胞后进行后续实验操作。

推荐工作液浓度：

1.外周血裂红白细胞：1:1000

2.原代细胞：1:1000-1:4000

3.细胞系：1:4000-1:10000

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