细胞生物学
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细胞常见问题及解决办法
2、细胞生长缓慢
4、细胞污染
5、细胞形态异常
发布时间：2025-02-18
1、培养的细胞不贴壁怎么办？
| 原因 | 解决办法 |
| 胰蛋白酶消化过度 | 缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度。 |
| 支原体污染 | 分离培养物，检测支原体。清洁支架和培养箱，如发现支原体污染，可选用商品化清除试剂或丢弃培养物。 |
| 培养液中无贴壁因子 | 改变培养液成分。 |
| 细胞特性，导致不易贴壁 | 可选用营养物包被培养器皿 |
2、细胞生长缓慢
| 原因 | 解决方案 |
| 生长培养基不合适 | 使用推荐的经过预热的生长培养基。 |
| 生长培养基中的血清质量不良 | 使用其他批次血清。 |
| 细胞传代次数过多 | 使用健康的低传代数细胞。 |
| 让细胞生长超过汇合状态 | 在哺乳动物细胞达到汇合状态前处于对数期时进行传代。 |
| 培养物被支原体污染 | 珍稀细胞可考虑选用商品化清除试剂，若仍无法清除则丢弃细胞、培养基和试剂。获取新的细胞储备液，并将其与新鲜培养基和试剂配合使用。 |
| 培养基PH变化 |
细胞换液，加入新培养基 |
3、培养基PH值变化迅速
| 原因 | 解决方案 |
| 培养箱CO2分压设置错误 | 培养箱CO2浓度矫正 |
| 培养瓶盖过紧 | 选用透气膜盖培养瓶或将瓶盖旋松1/4圈 |
| 碳酸氢盐系统缓冲能力不足 | 加入HEPES缓冲液，使其终浓度为10-25mM。 |
| 培养基中盐含量不正确 | 更换合适培养基 |
4、细胞污染
| 原因 | 解决方案 |
| 细胞培养操作不规范 | 严格无菌操作，定期消毒操作台和培养箱。 |
| 培养基或试剂被污染 | 检查培养基和试剂，若污染则丢弃更换新的试剂。 |
| 培养箱或操作台污染 | 定期消毒操作台和培养箱。 |
| 细胞本身携带污染 |
使用抗生素（如青霉素/链霉素）或抗支原体试剂处理污染细胞，必要时更换新的细胞系。 |
5、细胞形态异常
| 原因 | 解决方案 |
| 培养基成分改变 | 检测培养基ph值，必要时更换新鲜培养基 |
| 细胞密度过高或过低 | 调整细胞密度，确保适宜的细胞生长环境 |
| 细胞老化或传代次数过多 | 使用低代次细胞进行实验 |
| 细胞污染 | 定期检测细胞污染，必要时处理或更换 |
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