培养基变黄的原因分析及解决策略

发布时间：2025-03-10

  在细胞培养中经常会遇到一个问题：培养基变黄！

  培养基变黄是？培养基变黄是一种现象，其本质是培养基PH值下降所致的；

  那么导致培养基变黄的原因是什么？

  又要如何解决培养基变黄的问题呢？接下来，培镨生物为您解答：

序号	原因	验证策略	解决办法
1	培养基缓冲体系失衡	对培养基进行PH测定	培养基pH纠正或更换培养基
2	培养基污染	去培养基进行空培，观察是否污染	如空培养变黄，建议更换培养基
3	培养基CO2浓度过高，超过5%	对培养箱CO2浓度进行检测，确定浓度是否正确	建议重新设置培养箱CO2，对培养箱进行校准并保持稳定。
4	细胞过度生长	镜下观察细胞密度及状态，判断是否为细胞过度生长	及时进行细胞传代。
5	细胞污染	镜下观察细胞是否存在细菌污染，建议在200x下进行观察	贴壁细胞：根据污染情况不同，采用的解决方案也不同。轻度污染：建议8-10倍抗生素清洗和培养；重度污染：建议舍弃。
6	支原体污染	镜下观察：细胞形态发生改变，细胞周边存在大量的颗粒物质。	珍贵细胞可以考虑市面商品化去除支原体试剂；非珍贵细胞建议舍弃
7	细胞传代胰酶消化过渡，且培养瓶密封严密	1.镜下检查传代后细胞的状态；2.检查培养瓶是否密封严实（主要针对不透气瓶）	1.注意胰酶消化时长；2.建议更换为透气培养瓶
8	细胞特性	/	建议采用其他细胞进行培养体系的验证，以确定是否为细胞特异性。
9	血清污染	取血清尽心空培，确定是否存在污染	1.建议排查血清分装；2、更换新血清进行培养。

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