发布时间：2026-10-08
一、使用FcR封闭试剂与微珠对细胞进行磁性标记（磁珠分选）
▲操作要迅速，全程保持细胞低温，使用预冷溶液。这可以防止抗体在细胞表面发生封闭以及非特异性细胞标记。
▲下文给出的磁标记体系用量适用于不超过10⁷个有核细胞。当细胞数量少于10⁷个时，仍使用说明书规定的相同体积。若细胞数量更多，则按比例放大所有试剂体积与总体积（例如：处理2×10⁷个有核细胞时，所有试剂体积和总体积均采用规定用量的两倍）。
▲想要获得最佳实验效果，在磁分离或抗体标记前制备单细胞悬液十分重要。建议将细胞通过30um尼龙滤膜（分离前滤器，30um，货号# 130-041-407），去除可能堵塞柱子的细胞团块。
1. 细胞计数
2. 将细胞悬液以300×g离心10分钟，彻底吸弃上清液。
3. 每适量缓冲液中重悬至多10⁷个有核细胞（注：小鼠细胞缓冲液添加90uL，人源细胞缓冲液添加60uL）
4. 加入适量Fc受体封闭试剂。（注：小鼠FcR封闭剂添加10uL，人FcR封闭剂添加20uL）
5. 充分混匀，置于冰箱（2–8℃）孵育10分钟。
▲注：在冰上操作时需延长孵育时间。温度偏高和/或孵育时间过长可能造成细胞非特异性标记。
6. 按照厂家推荐量加入微珠，并遵照相应的实验方案操作。
二、Fc受体封闭试剂与抗体在细胞标记中的应用（流式分析/分选）
▲ 操作要迅速，保持细胞低温，并使用预冷溶液。此举可防止抗体在细胞表面封盖以及细胞非特异性标记。
▲ 下文荧光标记所用体积适用于不超过10⁷个有核细胞。当细胞数量少于10⁷个时，仍使用规定体积。若细胞数量更高，则相应按比例放大所有试剂体积与总体积（例如：处理2×10⁷个有核细胞时，所有试剂体积与总体积均采用规定量的两倍）。
▲ 想要获得最佳实验效果，在磁分离或抗体标记前制备单细胞悬液十分关键。将细胞通过30um尼龙滤膜（分离前滤器（30um），货号# 130-041-407），去除可能堵塞柱子的细胞团块。
1. 细胞计数
2. 将细胞悬液以300×g离心10分钟，彻底吸弃上清液。
3. 每适量缓冲液中重悬至多10⁷个有核细胞（注：小鼠细胞缓冲液添加90uL，人源细胞缓冲液添加80uL）
4. 加入适量Fc受体封闭试剂。（注：小鼠FcR封闭剂添加10uL，人FcR封闭剂添加20uL）5.充分混匀，置于冰箱（2–8℃）孵育10分钟。
▲注：在冰上操作时需延长孵育时间。温度偏高和/或孵育时间过长可能造成细胞非特异性标记。
6.按照厂商说明书建议加入相应量的抗体，并遵循对应的实验方案。